化妆品中新康唑等8种组分测定的数据分享及实验建议
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为科学规范做好化妆品抽样检验工作，根据《化妆品监督管理条例》《化妆品生产经营监督管理办法》，国家药监局组织制定了《2023 年国家化妆品抽样检验工作方案》。2023 年国家化妆品抽样检验工作中，要求对宣称祛痘类产品按照化妆品补充检测方法(BJH 202202)《化妆品中新康唑等8种组分的测定》对新康唑、苯硝咪唑、氯甲硝咪唑、奥硝唑、替硝唑、异丙硝唑、洛硝哒唑和羟基甲硝唑8种组分进行测定。
我们按照标准方法对标准品、化妆水样品、乳液样品和面霜样品进行了分析，并对实验中遇到的问题进行了简单的讨论，具体如下。
标准品分析结果
按照BJH 202202《化妆品中新康唑等8种组分的测定》中方法，使用大阪曹達 CAPCELL PAK C18 MGII 色谱柱对新康唑等8种组分标准品进行测定，得到结果如图1所示，8种组分分离及峰型良好。
同时按照方法中要求，对8种组分系列浓度样品进行分析，得到线性范围、标曲、相关系数、检出限、定量限结果如表1、2所示。
图1 新康唑等8种组分标准谱图（50 µg/L）
表1 线性范围、标曲、相关系数
表2 检出限、定量限结果
【色谱条件】
色谱柱：CAPCELL PAK C18 MGII S2; 2.0×100
流动相：A: 0.1%甲酸溶液 B:乙腈
B% 10%(0 min)-10%(2 min)-30%(5 min)-60%(6 min)-60%(7.5 min)-10%(8 min)
流动速：0.25 mL/min
温动度：40 °C
检动测：SCIEX QTRAP 5500; MRM
浓动度：按照方法配置。
混合标准储备溶液：准确移取标准储备溶液0.1 mL置于10 mL棕色容量瓶中，用50%乙腈溶液定容至刻度，摇匀，制成浓度为10 mg/L的混合标准储备溶液。
系列浓度标准品溶液：分别精密量取基质混合标准中间液适量，用空白基质提取液*配制得基质混合标准工作溶液
进样量：0.5 µL
*空白基质提取液：取空白试样0.5 g（精确到0.0001 g），置于25 mL具塞比色管中，加入饱和氯化钠溶液1 mL，涡旋1 min，分散均匀后加入乙腈1 mL，涡旋分散均匀后加入乙腈20 mL，涡旋30s，超声提取 30 min，加入乙腈定容至刻度，10000 rpm离心3 min，取上清液经0.22 µm微孔滤膜过滤后，作为空白基质提取液。
样品分析结果
按照方法，对化妆水、乳液、面霜3种不同基质样品进行了测定，结果如图2、3、4所示，化妆水、乳液样品中不含有新康唑等8种组分；面霜样品虽然出现部分峰，但保留时间与标准品均不一致，该样品同样不含有新康唑等组分。
图2 化妆水样品分析结果
图3 乳液样品分析结果
图4 面霜样品分析结果
【色谱条件】
色谱柱： CAPCELL PAK C18 MGII S2; 2.0×100
流动相：A: 0.1%甲酸溶液 B:乙腈
B% 10%(0 min)-10%(2 min)-30%(5 min)-60%(6 min)-60%(7.5 min)-10%(8 min)
流动速：0.25 mL/min
温动度：40 °C
检动测：SCIEX QTRAP 5500; MRM
浓动度：称取样品0.5 g（精确到0.0001 g），置于25 mL具塞离心管中，加入饱和氯化钠溶液1 mL，涡旋1 min，分散均匀后加入乙腈1 mL，涡旋分散均匀后加入乙腈20 mL，涡旋30 s，超声提取30 min，加入乙腈定容至刻度，10000 rpm离心3 min，取上清液经0.22 μm微孔滤膜过滤后，滤液作为供试品溶液备用。
进样量：0.5 µL
液相分析注意事项
1.原方法中进样量为2 µL，但由于样品及标准品均使用基质提取液进行稀释或提取，该溶剂中含有有机相比例高，在2 µL进样量下，会导致出峰较早的羟基甲硝唑、洛硝哒唑、苯硝咪唑等峰型前延，特别是羟基甲硝唑同时会出现裂峰的问题，如图5所示。
该问题的解决可通过两种方式：
1）降低进样量（本实验以0.5 μL进样量进样时峰型正常）。
2）使用初始比例流动相，再对标准品或样品进行稀释。
图5 溶剂效应导致峰型异常
2.原方法中，不同组分响应不完全相同，线性范围建议根据实际测定结果进行相应调整。
质谱条件
质谱检测条件使用方法中的参考条件，如表3所示，若定量限不能满足时，建议根据仪器情况进行质谱方法优化。
表3 新康唑等8种组分监测离子对及相关参数设定
结论
综上所述，使用大阪曹達 CAPCELL PAK C18 MGII S2; 2.0mm i.d.×100mm色谱柱，按照化妆品补充检测方法(BJH 202202)《化妆品中新康唑等8种组分的测定》，能够获得良好检测结果，满足标准要求。
化妆品补充检测方法(BJH 202202)
《化妆品中新康唑等8种组分的测定》
推荐用柱 F94043
CAPCELL PAK C18 MGII S2; 2.0×100