螺内酯的有关物质和含量测定 参考《中国药典》（2020版）
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螺内酯（Spironolactone）又名螺瑞酮、安体舒通，是一种低效利尿剂，其结构与醛固酮相似，为醛固酮的竞争性抑制剂。由于螺内酯仅作用于远曲小管和集合管，对肾小管其他各段无作用，故利尿作用较弱；另外，螺内酯对肾小管以外的醛固酮靶器官有作用，也是治疗高血压的辅助药物。
按照《中国药典》（2020版），使用CAPCELL PAK C8 DD和C8 UG120色谱柱进行有关物质的分析，使用CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱进行含量测定的分析，具体实验结果如下：
1. 有关物质
药典中螺内酯有关物质项下分析方法，要求使用C8色谱柱，以乙腈 / 四氢呋喃 / 水 = 8 / 18 / 74为流动相，流速1.8 mL / min。系统适用性要求：系统适用性溶液色谱图中（254 nm），螺内酯峰与坎利酮峰之间的分离度应大于1.4，对照溶液（2）色谱图中（254 nm）主峰的信噪比应大于6。
螺内酯 (M.W. 416.57)
Spironolactone
坎利酮 (M.W. 340.46)
Canrenone
分别使用两款CP C8色谱柱对系统适用性溶液和对照溶液（2）进行了分析。需要注意的是，由于流速为1.8 mL / min，使用250 mm柱长的色谱柱时压力较高，所以我们选择使用150 mm柱长的色谱柱进行分析。
1.1 CAPCELL PAK C8 DD 色谱柱分析结果
系统适用性溶液和对照溶液（2）的分析结果见图1、2和表1、2。系统适用性溶液分析中，螺内酯峰与坎利酮峰之间的分离度为2.857，能够满足药典中分离度大于1.4的要求；对照溶液（2）分析中，主峰的信噪比为18.90，满足药典中大于6的要求。
图1 系统适用性溶液分析结果（C8 DD）
表1 各峰积分结果表
图2 对照溶液（2）分析结果（C8 DD）
表2 各峰积分结果表
色谱条件：
色谱柱：CAPCELL PAK C8 DD S5; 4.6×150
流动相：乙腈 / 四氢呋喃 / 水 = 8 / 18 / 74
流动速：1.8 mL / min
温动度：35 °C
检动测：PDA 254 nm
浓动度：
系统适用性溶液：螺内酯和坎利酮均为25 μg / mL
对照溶液（2）：1.25 μg / mL（少量四氢呋喃溶解后，流动相稀释）
进样量：20 µL
1.2 CAPCELL PAK C8 UG120 色谱柱分析结果
系统适用性溶液和对照溶液（2）的分析结果见图3、4和表3、4。系统适用性溶液分析中，螺内酯峰与坎利酮峰之间的分离度为1.681，能够满足药典中分离度大于1.4的要求；对照溶液（2）分析中，主峰的信噪比为20.07，满足药典中大于6的要求。
图3 系统适用性溶液分析结果（C8 UG120）
表3 各峰积分结果表
图4 对照溶液（2）分析结果（C8 UG120）
表4 各峰积分结果表
色谱条件：
色谱柱：CAPCELL PAK C8 UG120 S5; 4.6×150
流动相：乙腈 / 四氢呋喃 / 水 = 8 / 18 / 74
流动速：1.8 mL / min
温动度：35 °C
检动测：PDA 254 nm
浓动度：
系统适用性溶液：螺内酯和坎利酮均为25 μg / mL
对照溶液（2）：1.25 μg / mL（少量四氢呋喃溶解后，流动相稀释）
进样量：20 µL
2. 含量测定
药典中螺内酯含量测定项下分析方法，要求使用C18色谱柱，以乙腈 / 水 = 50 / 50为流动相。系统适用性要求：理论板数按螺内酯峰计算不低于3000，螺内酯峰与相邻杂质峰之间的分离度应符合要求。
使用CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱对对照品溶液进行了分析，结果见图5、6和表5。螺内酯峰理论板数为19743，满足药典中不低于3000的要求；螺内酯峰与其后杂质峰之间的分离度为4.664，满足药典要求。
图5 对照品溶液分析结果（C18 MGII）
图6 图5局部放大图
表5 各峰积分结果表
HPLC Conditions ：
色谱柱： CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6×250
流动相：乙腈 / 水 = 50 / 50
流动速：1.0 mL / min
温动度：35 °C
检动测：PDA 238 nm
浓动度：对照品溶液：25 μg / mL（溶剂为流动相）
进样量：20 µL
结 论
综上所述，按照《中国药典》（2020版）中螺内酯有关物质项下分析方法，使用CAPCELL PAK C8 DD和C8 UG120色谱柱，均可以得到满足药典要求的分析结果。
按照《中国药典》（2020版）中螺内酯含量测定项下分析方法，使用CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱，也可以得到满足药典要求的分析结果。
2020年版《中华人民共和国药典》
螺内酯有关物质分析推荐用柱
F90984 CP C8 DD S5; 4.6×150
F71503 CP C8 UG120 S5; 4.6×150
螺内酯含量测定推荐用柱
F92533 CP C18 MGII S5; 4.6×250