6.3 化妆品中CI 10020等11种原料的检验方法 数据分享、分析注意事项和CP柱推荐
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国家药品监督管理局发布了“国家药监局关于将油包水类化妆品的pH值测定方法等21项制修订项目纳入化妆品安全技术规范（2015年版）的通告（2023年第41号）”。新增14项检验方法，纳入《化妆品安全技术规范（2015年版）》，自通告发布之日起实施。
今天给大家带来的是“化妆品中CI 10020等11种原料的检验方法”的数据分享、分析注意事项和CP色谱柱推荐。
实验参照“化妆品中CI 10020等11种原料的检验方法”对该11种禁用组分进行了测定，并进行了化妆水、乳液样品的确认。
1. 标准品分析结果
在筛选色谱柱后，用分离及峰形相对更好的CAPCELL PAK C18 MGII S3色谱柱进行了梯度优化，降低10-20 min的梯度斜率后，对CI 10020等11种原料混合溶液进行分析，结果如图1、表1所示，11种原料与其相邻色谱峰均可达到分离度大于1.5的基线分离结果，分离良好。
图1梯度调整后11种原料分析结果
表1 11种原料分离结果
【色谱条件】
色谱柱：CP C18 MGII S3; 4.6×250 mm
流动相：A：0.02 mol/L 乙酸铵 B：乙腈
B% 2%(0 min)-2%(5 min)-10%(7 min)-35%(11 min)-45%(32 min)-90%(34 min)-2%(35 min)
流 速：0.80 mL/min
柱 温：35℃
检 测：PDA 250 nm; 500 nm; 620 nm
样 品：除酸性绿1、食品红14、溶剂绿7为100 μg/mL之外，其余浓度均为50 μg/mL。
进样量：5 μL
2. 样品分析结果及方法学
2.1线性实验考察
如表2所示，11种物质在不同范围内线性良好，相关系数均大于0.99，满足标准要求。检出限及定量限见表2。
表2 线性范围考察及检出限、定量限
2.2精密度考察
取标准系列曲线中“混标3”溶液，使用自动进样器精确进样适量注入液相色谱仪分析测定，连续进样6次，记录各色谱峰的峰面积计算精密度。分析结果中精密度RSD%测定结果如表3所示，6针RSD在0.31%-1.92%，均小于2%，该方法精密度良好。
表3 精密度考察结果
2.3样品分析
在上述条件下对乳液、面霜、染发剂等化妆品样品进行分析，结果如图2-4所示，三个样品中均未检出11种原料峰。
图2 乳液样品分析图
图3 面霜样品分析图
图4染发剂样品分析图
2.4 回收率
选择样品基质较为干净的面霜样品进行加标回收实验，除酸性绿1、食品红14、溶剂绿7添加10 μg/mL之外，其他8种原料分别添加5 μg/mL，结果如表4所示，CI 10020等11种原料的回收率在94.04%-108.20%之间，满足标准（89.5%-112.7%）要求。
表4 面霜加标回收结果
3. 分析注意
部分样品可能存在较为严重的基质干扰。由于某乳液样品中在峰1出峰位置出现基质干扰，建议使用基质干净的样品进行加标回收实验。
图5 乳液样品加标色谱图
4. 结论
使用CAPCELL PAK C18 MGII S3; 4.6×250 mm色谱柱，在新化妆品检测方法“化妆品中CI 10020等11种原料的检验方法”基础上微调梯度后，能够获得良好检测结果，满足标准要求。
5. 阳性结果确认
5.1 标准品分析结果
按照“化妆品中CI 10020等11种原料的的检验方法”中的方法，对CI 10020等11种原料进行测定。但分析过程中发现食品蓝5未检出，经针泵（Q1、MS2、MRM）确认无法找到母离子、子离子（图10），因此对其余10种原料进行分析，得到结果如图6所示，10种组分峰形良好。
图6 CI 10020等10种原料标准谱图
【色谱条件】
色谱柱：CORE C18 S2.7; 2.1×100 mm
流动相：A: 10 mmol/L乙酸铵溶液(pH5.5) B: 0.02%乙酸乙腈
B% 5%(0 min)-95%(10 min) -95%(16 min) -5%(17 min) -5%(22 min)
流 速：0.3 mL/min
温 度：室温
检 测：SCIEX QTRAP 5500; MRM
浓 度：混标储备液，配置酸性绿1、食品红1、食品红9、酸性蓝1、食品蓝5、食品绿3、酸性黄73、酸性红87、食品红14、溶剂绿7各100 ppb，酸性橙6 1000 ppb。
进样量：2 µL
5.2 样品分析结果
按照方法，对乳液、面霜、染发剂3种不同基质样品进行了测定，结果分别如图7-9所示，3种样品中均不含CI 10020等10种组分。
图7 乳液样品分析结果
图8 面霜样品分析结果
图9 染发剂样品分析结果
【色谱条件】
色谱柱：CORE C18 S2.7; 2.1×100 mm
流动相：A: 10mmol/L乙酸铵溶液(pH5.5) B: 0.02%乙酸乙腈
B% 5%(0 min)-95%(10 min) -95%(16 min) -5%(17 min) -5%(22 min)
流 速：0.3 mL/min
温 度：室温
检 测：SCIEX QTRAP 5500; MRM
浓 度：分别精密称取乳液、面霜、染发剂样品0.2 g于10 mL容量瓶，加0.02 mol/L乙酸铵溶解并定容。
进样量：2 µL
5.3 分析注意事项
① 分析过程中发现食品蓝5标准品未能检出，按照标准中方法未见明显色谱峰，经针泵（Q1、MS2、MRM）确认时无法找到母离子、子离子，建议排查标准品情况。
图10 食品蓝5 MRM分析图
② 酸性橙浓度较高。
5.4 质谱条件
质谱检测条件使用方法中的参考条件（表5），若定量限不能满足时，建议根据仪器情况进行质谱方法优化。
表5 CI 10020等11种组分监测离子对及相关参数设定
5.5 结论
使用CAPCELL CORE C18 S2.7; 2.1×100mm色谱柱，按照新化妆品检测方法“化妆品中CI 10020等11种原料的检验方法“分析，食品蓝5未能得到良好检出（未找到相关母离子、子离子），但其余10种原料均能获得良好检测结果，满足标准要求。