三耀精细化工品销售（北京）有限公司

官能团	细孔径 (nm)	粒径 (μm)	比表面积 (m2/g)	C%	密度 (μmol/m2)	pH范围	USP
PFP	9	2.7	150	5	60	2~9	L43

 

CORE PFP和CORE C₁₈的不同之处

PFP色谱柱在反相分析中显示了和C₁₈柱不同的选择性，即由于苯环上置换的氟原子的存在引起的氢键作用及偶极-偶极相互作用，另外也可能存在苯环上π电子间的π-π相互作用。
图1为在相同的流动相条件下CAPCELL CORE PFP S2.7和CAPCELL CORE C₁₈ S2.7对氢化可的松和可的松的保留比较。

 

【液相条件】
流动相：水 / 乙腈 = 70 / 30
流　速：400 μL/min
温　度：40℃
检测器：UV 245 nm
进样量：1 μL
样　品：1. 氢化可的松（25ppm） 2. 可的松（25ppm）

 

CAPCELL CORE PFP S2.7和CAPCELL CORE C₁₈ S2.7相比，在相同的分析条件下不仅保留时间缩短，同时分离度也得到了提高。在对氢化可的松和可的松的分离中，CAPCELL CORE PFP S2.7对两种化合物结构中唯一不同的羟基和羰基体现了更加优越的识别能力。

和CAPCELL CORE C₁₈ S2.7相比，因CAPCELL CORE PFP S2.7自身选择性的不同，对两种物质得到了更好的分离度。以保证相同分离度为前提，提高CAPCELL CORE PFP S2.7分析时有机相比例，结果如图2。

 

【液相条件】

流动相：水 / 乙腈 = 70 / 30

　　　　水 / 乙腈 = 55 / 45

流　速：400 μL/min

温　度：40℃

检测器：UV 245 nm

进样量：1 μL

样　品：1. 氢化可的松（25ppm） 2. 可的松（25ppm）

 

CAPCELL CORE PFP S2.7分析条件中有机相比例提高之后，保留时间缩短，在得到同等分离度的情况下，保留时间仅为CAPCELL CORE C₁₈ S2.7的一半。

综上，因PFP和C₁₈填料自身选择性的不同，在对氢化可的松和可的松的分离中，CAPCELL CORE PFP S2.7在提高分离度的基础上还能缩短保留时间。

 

CAPCELL CORE PFP的优势

特别适合于结构上具有微小差异的化合物的分析。

 

类固醇类激素的分析

 

 

 

【液相条件】

色谱柱：CAPCELL CORE PFP S2.7; 2.1 mm i.d. × 150 mm

流动相：A) 水 B) 乙腈

　　　　B 30%(0 min)->60%(4.5min)->30%(4.6min)

流　速：500 μL/min

温　度：40 ℃

检测器：UV 220 nm

进样量：3 μL

 

乙酰脱氧瓜萎镰菌醇的分析

 

 

【液相条件】

色谱柱：CAPCELL PAK C₁₈ MGII S3; 2.0 mm i.d. × 150 mm

　　　　CAPCELL CORE PFP S2.7; 2.1 mm i.d. × 150 mm

流动相：水 / 乙腈 = 80 / 20

流　速：400 μL/min

温　度：40 ℃

检测器：UV 220 nm

进样量：1 μL

样　品：1. 15-乙酰脱氧瓜萎镰菌醇(25 ppm)  2. 3-乙酰脱氧瓜萎镰菌醇(25 ppm)

 

对于具有临、间、对结构的芳香族化合物也有良好的分离能力。

 

氟化苯类化合物的分析

 

 

【液相条件】

色谱柱：CAPCELL CORE PFP S2.7; 2.1 mm i.d. × 150 mm

流动相：A) 水 B) 乙腈

　　　　B 10%(0 min)->15%(29.5min)->10%(29.6min)

流　速：400 μL/min

温　度：40℃

检测器：UV 240 nm

进样量：1 μL

样　品：各20 ppm

 产品一览表

■PFP

 

官能团	细孔径 (nm)	粒径 (μm)	比表面积 (m2/g)	C%	密度 (μmol/m2)	pH范围	耐压
C18 (十八烷基)	9	2.7	150	7	2.9	1.5~10	60
C18 (十八烷基)	16	2.7	90	5	2.6	2~10	60
C18 (十八烷基)	30	2.7	40	1.3	1.5	2~10	60
ADME (金刚烷基)	9	2.7	150	5.5	2.5	2~9	—
AQ (C27)	16	2.7	90	4	1.4	2~10	60
PFP (五氟苯基)	9	2.7	150	5	3.1	2~10	60
PC (磷酸胆碱基)	9	2.7	150	—	0.94	2~7.5	60

 

※色谱柱寿命随测定温度和流动相有机溶剂含量而改变。
3) 请过滤（0.45 μm以下滤膜）流动相去除杂质后再进行充分脱气。另外，为防止由异物导致的色谱柱入口处过滤筛板堵塞，建议使用线上过滤器。
4) 新色谱柱使用出厂报告中标示的流动相封存。若要置换成含无机盐的流动相，请注意置换程序，不要造成盐析。

5) 以下使用方法一般会导致色谱柱劣化，请避免此类操作。

　频繁变更流动相的组成或直接变换成相溶性差的流动相

　色谱柱入口压力急剧变化

　使用高粘度流动相导致高柱压

　用水长时间冲洗

 

样品溶液的配制

 

1) 请尽量将样品溶解在流动相中进行分析。

2) 样品溶液若采用洗脱能力强的溶剂，可能会造成色谱峰的展宽，分离度变差，并且在色谱柱入口处会有样品析出，故需注意。

3) 样品溶液中如有不溶物时，请用滤膜（0.45μm以下）过滤。

4) 样品溶液的pH请不要超过色谱柱的可用pH范围。

分析时的注意事项

 

由于CAPCELL CORE采用了核-壳基质，因此填料的比表面积比完全多孔型要小，负载量也相对较少。因此，从完全多孔型填料柱过渡到CAPCELL CORE时，如果原来是在负载量上限附近进行分析的，那么有必要降低样品导入量。

色谱柱的保存

1) 请用附带的堵头密封，保存在温差小的阴冷处。

2) 一个月以内的保存，请使用与所用流动相组成相同的有机溶剂和水的混合溶液（不含酸和无机盐）进行置换(避免只用水来进行置换)。

3) 若是一个月以上的长期保存，在进行了2的处理后，用出厂时的溶剂置换保存（请参考出厂报告）。

色谱柱的连接

请按照图1所示进行配管连接。若配管不匹配，特别是直接使用其他类型色谱柱所用配管时，锥箍前端的长度（图1中的V）与尾端接头的长度（图1中的L）经常会不同，因而引发故障。
若L＞V，会产生死体积，甚至出现色谱峰展宽或拖尾现象，并且分离变差。
若L＜V，由于锥箍无法密封，所以会导致漏液。
※ 频繁更换色谱柱，可能会导致螺头的锥箍损坏而发生漏液现象。这种情况下若进一步拧紧，螺母的头部可能会发生断裂。

图1 色谱柱的连接图

 

故障与对策

使用高效液相色谱法进行测定时所出现的问题，存在各种原因。但由于无法将其一一列举，故在此只说明色谱柱及其周边较容易出现的问题。