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CAPCELL PAK SEC
CAPCELL PAK SEC系列色谱柱，专为多肽、蛋白质和核酸等化合物的分析所开发，凭借其出色的性能和广泛的应用范围，将为生物医药、食品安全、环境监测等领域的研究人员和分析师提供强有力的支持。
硅胶基材分子排阻模式色谱柱
采用高品质的硅胶作为基材，具有优异的稳定性，确保了CAPCELL PAK SEC可以长期安定使用。
此外，分子排阻模式使得该产品特别适合于多肽、蛋白质和核酸等大分子的分析。
独有技术获得更优秀分离性能
采用了独特的生产技术，确保了出色的分离效果，有效分离目标分子与杂质，提高分析的准确性。
更低的批次差异
作为专业的硅胶生产企业的产品，CAPCELL PAK SEC系列色谱柱在硅胶选品阶段就开始为更低的批次差异作出努力，这意味着用户不同时期购买的色谱柱都具有高度一致的性能，为实验结果的重复性和可靠性提供了保障。
孔径选择应对各种分子量范围
不同的孔径大小可以应对不同的分子量范围，使CAPCELL PAK SEC系列色谱柱在多种分析应用中都具有广泛的适用性。
物性值
| 色谱柱类型 | 细孔径 (nm) |
粒径 (μm) |
内径 (mm) |
长度 (mm) |
划分范围 (kDa) |
pH范围 | 耐压 (MPa) |
货号 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| SEC | 12.5 | 5 | 7.8 | 300 | 5~150 | 2~7.5 | 8 | F82135 |
| SEC | 12.5 | 10 | 7.8 | 300 | 5~150 | 2~7.5 | 2 | F82145 |
| SEC | 25 | 5 | 7.8 | 300 | 10~500 | 2~7.5 | 8 | F82235 |
| SEC | 25 | 10 | 7.8 | 300 | 10~500 | 2~7.5 | 2 | F82245 |
| SEC | 100 | 5 | 7.8 | 300 | 100~7500 | 2~7.5 | 8 | F82535 |
CAPCELL PAK SEC125 校正曲线
【液相条件】
色谱柱：7.8 mm i.d. × 300 mm
流动相：100 mmol/L Phosphate buffer + 300 mmol/L NaCl (pH 7.0)
流 速：1.0 mL/min
温 度：25 ℃
检测器：UV 220 nm
进样量：20 µL
样 品：1、670,000 Da，2、156,000 Da，3、75,000 Da，4、43,000 Da，5、13,700 Da，6、6,500 Da，7、246 Da
CAPCELL PAK SEC250 校正曲线
【液相条件】
色谱柱：7.8 mm i.d. × 300 mm
流动相：100 mmol/L Phosphate buffer + 300 mmol/L NaCl (pH 7.0)
流 速：1.0 mL/min温 度：25 ℃
检测器：UV 220 nm
进样量：20 µL
样 品：1、1,340,000 Da，2、670,000 Da，3、156,000 Da，4、75,000 Da，5、43,000 Da，6、13,700 Da，7、6,500 Da，8、246 Da
标准蛋白分析例
【液相条件】
色谱柱：CAPCELL PAK SEC125 S5 7.8 mm i.d. x 300 mm
流动相：100 mmol/L Phosphate buffer + 100 mmol/L Na2SO4 (pH 6.7) + 0.05% NaN3
温 度：25 ℃
检测器：UV 280 nm
进样量：20 µL样 品：Proteins，1、Thyroglobulin (670,000 Da)，2、Ovalbumin (43,000 Da)，3、Ribonuclease A (13,700 Da)，4、p-Aminobenzoic acid (137 Da)
【液相条件】
色谱柱：CAPCELL PAK SEC250 S5 7.8 mm i.d. x 300 mm
流动相：100 mmol/L Phosphate buffer + 100 mmol/L Na2SO4 (pH 6.7) + 0.05% NaN3
温 度：25 ℃
检测器：UV 280 nm
进样量：20 µL
样 品：Proteins，1’、Thyroglobulin dimer (1,340,000 Da)，1、Thyroglobulin (670,000 Da)，2、Ovalbumin (43,000 Da)，3、Ribonuclease A (13,700 Da)，4、p-Aminobenzoic acid (137 Da)
CAPCELL PAK SEC系列色谱柱使用说明书
在此，非常感谢您选购我公司的分子排阻CAPCELL PAK SEC系列色谱柱。
尺寸排阻色谱柱 (Size Exclusion Chromatography (SEC)) ，使用了具有细孔的填料作为固定相。小分子深入到细孔内部，在色谱柱中溶出需要较长的时间。而大的分子难以进入细孔内部，会很快从柱中溶出。尺寸排阻色谱柱利用这个时间差来分离、纯化分子量不同的分子。
CAPCELL PAK SEC系列色谱柱使用了专为其开发的高纯度硅胶作为基材。
色谱柱的启用
每一根色谱柱在出厂前，都经过了严格的出厂测试，只有满足出厂标准方可出售。每一根CAPCELL PAK SEC系列色谱柱的柱盒内均含有色谱柱的性能测试报告供使用者查看。性能测试报告包含了色谱柱柱号，色谱柱规格，填料批次号，理论塔板数和所用的测试条件等的检测数据。为了保证色谱柱的正常使用，建议在使用前检查以下事项：
1) 检查色谱柱包装盒是否完整，有无拆封和碰撞痕迹。
2) 色谱柱标签是否与包装上的柱号、柱型相符，色谱柱两端堵头是否完整。
3) 色谱柱包装盒内是否有色谱柱性能测试报告。
色谱柱的安装
1) 安装色谱柱之前，请使用超纯水对液相色谱系统进行冲洗置换。
2) 为尽量减少死体积，色谱柱的接头使用了外径1/16英寸配管的螺头(MALE NUT)。请确保装置的配管接头正确连接，并且锥箍的顶端已插入接头内侧(参照图1)。若配管不匹配，特别是直接使用其他类型色谱柱所用配管时，锥箍前端的配管长度（图1中的V）与色谱柱尾端接头的长度（图1中的L）经常会不同，因而引发故障。
若L＞V，会产生死体积，甚至出现色谱峰展宽或拖尾现象，并且分离变差。
若L＜V，由于锥箍无法密封，所以会导致漏液。
图1 色谱柱的连接图
※频繁更换色谱柱，可能会导致螺头的锥箍损坏而发生漏液现象。这种情况下若进一步拧紧，螺母的头部可能会发生断裂。
3) 新色谱柱的保存液请参看色谱柱的性能测试报告，SEC系列色谱柱为0.1 mol/L Na2SO4 + 0.05%NaN3 in 0.1 mol/L Phosphate Buffer（pH6.7）。为避免缓冲盐的析出，请使用超纯水进行充分置换后，换为流动相进行冲洗平衡，置换冲洗时流速不超过0.5 mL/min。
色谱柱的使用
流动相
可用流动相的种类通常为水系流动相，一般使用有机相比例不超过30%，由于通常流动相中缓冲盐浓度较高，务必注意不要发生盐析，盐析会导致色谱柱的损坏。
压力
SEC系列色谱柱耐压较低，请注意使用压力。
建议使用时缓慢增加/降低流速至设定值。
更换流动相、冲洗平衡时，流速不要超过0.5 mL/min。
pH范围
CAPCELL PAK SEC系列色谱柱的可用pH范围为2-7.5。
为防止色谱柱的快速劣化，请注意流动相的pH不要超过使用范围。如果pH频繁发生大幅度的变化，会引起重现性变差、色谱柱提前劣化等问题。
使用温度
建议在10 ℃至30 ℃之间使用。
使用方向
请按照色谱柱标签所示方向进行安装，尽量不要双向混用。
分析注意事项
样品
1.请尽量将样品溶解在流动相中进行分析。
2.溶解后样品使用0.22或0.45 μm过滤器过滤。
3.样品若不易溶于流动相中，进样后会在色谱柱中析出，造成柱压的急剧上升，故需注意。
4.样品溶液的pH请不要超过色谱柱的可用pH范围。
5.蛋白质样品配置时，操作应尽量轻柔。
1.请配备在线过滤头（0.45 μm以下滤膜），流动相去除杂质后再使用在线脱气机进行充分脱气。
2.为防止由异物导致的色谱柱入口处过滤筛板堵塞，建议使用线上过滤器。
色谱柱的冲洗保存
冲洗
当色谱柱峰形发生分叉、拖尾、前延等情况，或保留时间波动、分离度降低和压力升高等情况时，表明色谱柱受到一定污染，可使用适当方法进行冲洗。
1.去除离子性物质
使用高浓度缓冲盐的流动相或酸性水溶液进行冲洗。
例如：0.3 - 0.5 mol/L Na2SO4 (pH 3.0)
2.去除疏水性物质
提高有机溶剂比例进行冲洗。由于流动相中含有有机溶剂，需要注意不要发生盐析。
例如：10-20% 水溶性有机溶剂（甲醇、乙醇、乙腈）+ 50 mmol/L 磷酸盐缓冲液（pH 7.0）。
3.如果使用特殊流动相可直接致电技术中心进行咨询。
保存
请使用出厂保存溶剂（0.1 mol/L Na2SO4+0.05%NaN3 in 0.1 mol/L Phosphate Buffer（pH6.7））置换流动相，置换流速请使用0.5 mL/min以下。在10-30℃ 室温下保存色谱柱。若不能使用NaN3时，可将其保管在所用溶剂中，每月需更换一次保存溶剂。
故障与对策
使用高效液相色谱法进行测定时所出现的问题，存在各种原因。但由于无法将其一一列举，故在此只说明色谱柱及其周边较容易出现的问题，或请致电技术中心或公众号进行咨询。
| 问题现象 | 原因 | 对策 |
|---|---|---|
| 色谱柱压升高 | 异物堵塞 ①流动相、样品溶液中杂质、不溶物 ②配管内的水垢 ③活塞密封圈的碎片 ④样品成分的析出 |
预先用滤膜对流动相、样品溶液进行过滤。 安装线上过滤器。 清理配管及更换活塞密封圈。 使用流动相配制样品溶液。 |
| 色谱峰分裂、拖尾、展宽 | ①由于配管连接错误导致产生死体积 ②流动相条件不适合 离子抑制法：抑制不充分（样品量过多） 离子对法：离子对试剂浓度不足（样品量过多） ③色谱柱劣化 ※若色谱柱劣化或填充层出现裂隙，则无法进行修复。 |
重新连接配管。 考察pH、盐浓度、样品量等。 考察离子对试剂浓度、pH、样品量等。 通过柱效检测来确认色谱柱性能 |
| 保留时间延迟或不稳定 | ①漏液（根据泵压值进行判断） ②流动相条件不适合 ③色谱柱的平衡时间不够 |
检查泵、配管系列的漏液情况。 充分平衡。 |
| 保留时间变短 | ①使用强酸或碱导致配位基断裂（劣化） ②流动相条件不适合 ③色谱柱的平衡时间不够 |
充分平衡。 |
CAPCELL PAK SEC系列色谱柱在出厂前已进行了严格的性能检查。但是万一出现不合格产品，烦请您联系我公司。
但是，若未按照色谱柱寿命相关事项或上述使用注意事项进行使用而导致劣化时，我们不能承担该类责任，望请谅解。
收到商品后10天以内若无投诉，即可认定为合格品。在此之后不能再更换，望请谅解。
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