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糖分析色谱柱
糖被分为单糖类、二糖类和多糖类等。糖类易溶于水，但存在多种异构体，分子量的幅度范围较大且没有发色基团，因此通常使用RI检测器进行直接检测，故而糖类的高灵敏度分析很难实现。在CAPCELL PAK系列中用于分离糖的色谱柱填料种类包含反相分配、正相分配和强阴离子交换等规格。
*SUCREBEAD I 已于2017年11月宣布停产。
糖类专用高灵敏度分析法
糖在强碱性条件下羟基发生解离，带负电荷，因此可在阴离子交换模式下进行分离。
另外，PAD检测器能在金电极上检测出已解离的羟基的电气化学活性，因此能在强碱性条件下针对解离后的糖类进行选择性的检测。通过这样的组合，可以轻松搭建对未经修饰的糖进行高灵敏度、高选择性的HPLC糖分析系统。
使用聚合物包被型糖分析专用色谱柱SUCREBEAD，在强碱性条件下对已解离的糖以阴离子交换模式进行保留、分离和检测。
这种方法可提高分离选择性，同时通过半微量化可以提高灵敏度。
对于流动相流量较少的半微柱LC来说，电解池中分析对象的滞留时间会增加。这样不仅会提高反应效率，峰高和峰面积也有增大的趋势。
色谱柱内径差异对反应效率的影响
柱后法
柱后法是指在使用ODS色谱柱或NH2色谱柱对糖实现分离的基础上，在色谱柱的出口端混合碱液进行检测的方法。这种方法可提高分离选择性，同时与RI检测器相比，能提升数十倍的灵敏度。
单糖、二糖、三糖在RI及PAD检测器下进行同时分析的比较
色谱柱：CAPCELL PAK NH2 UG80; 2.0 mm i.d. × 250 mm
流动相：RI：85% CH3CN
PAD：A) H2O, B) CH3CN
B% 90% (0min)→90% (8min)→70% (30min)→70% (35min)→90% (35.1min) Gra.
流 速：200 μL/min
温 度：40℃
pH调整液：500 mmol/L LiOH, 400 μL/min （使用PAD时）
检 测：RI（下段），PAD（上段）
进样量：5 μL
样 品：各样品以水溶解稀释，各670 μg/mL
SUCREBEAD II
以强碱性阴离子交换树脂为填料的聚合物型色谱柱
强碱性条件下优越的耐久性
pH使用范围：2.5-14.0
使用硬质聚合物，具有良好耐久性
最高使用压力：8.0 MPa
更适用于二糖、寡糖、酸性糖、糖醇的分析
多糖（菊糖）的分析
二糖的构造异构体
色谱柱：SUCREBEAD II; 2.0 mm i.d. × 250 mm
流动相：0.1 mol/L NaOH + 0.04 M AcONa
流 速：300 μL/min
温 度：25℃
进样量：1 μL
样 品：各10 mg/mL等量混合
牛奶糖中单糖与二糖的分析
色谱柱：SUCREBEAD II; 2.0 mm i.d. × 250 mm
流动相：0.1 mol/L NaOH
流 速：200 μL/min
检 测：PAD
温 度：20℃
进样量：2 μL
产品一览表
■SUCREBEAD Ⅱ
| 产品编号 | 类型 | 粒径 (μm) |
内径 (mm) |
柱长 (mm) |
|---|---|---|---|---|
| F80111 | — | 7 | 2.0 | 35 G |
| F80113 | — | 7 | 2.0 | 150 |
| F80114 | — | 7 | 2.0 | 250 |
G : 保护柱
SUCREBEAD II高效液相色谱柱使用说明书
SUCREBEAD II 是采用均一粒径的高分子颗粒作为基质，键合季铵盐的阴离子交换树脂所填充的高效液相色谱柱。
为了能够长期且稳定地使用色谱柱，请在熟读该使用说明书后进行正确使用。
色谱柱的使用
1.强烈撞击可能会造成色谱柱劣化，请小心谨慎使用。
2.请在压力指示为0时进行色谱柱的安装和拆卸。
3.色谱柱最大使用压为8 MPa。
4.请注意不要让气泡进入色谱柱。
5.色谱柱填料的耐热性大约为80℃。
色谱柱的安装
1.色谱柱的接头使用了外径1/16英寸配管的螺头(MALE NUT)。请确保装置的配管接头正确连接，并且锥箍的顶端已插入接头内侧（参照图1）。
2. 安装色谱柱之前，请将装置配管内的液体置换成所用的流动相。
3. 请按照色谱柱标签上的箭头方向来安装色谱柱。
图1 色谱柱的连接图
流动相
1.糖类的分析利用了其羟基在碱性条件下发生解离的原理。虽然SUCREBEAD II的适用pH范围是2.5到14，但是请使用碱性的流动相，并且不要使用有机溶剂。
2.请确认流动相没有发生盐析，在过滤（0.45 μm以下滤膜）去除杂质后进行充分脱气。色谱柱入口处使用了孔径2 μm的过滤筛板。
流动相吸收空气中的CO2后pH值会发生变化，故需注意。
3.新色谱柱使用附带色谱柱报告中标示的流动相封存。溶剂的蒸发会造成盐的析出，请注意避免。
4.以下使用方法一般会导致色谱柱劣化，请避免此类操作。
频繁变更流动相的组成
色谱柱压力的急剧变化
5.为了得到稳定的保留时间，请对色谱柱进行充分的平衡。
样品溶液的配制
1.请尽量将样品溶解在水中进行分析。
2.若样品溶液中有不溶物残留，请用滤膜（0.45 μm以下）过滤。
色谱柱的保存
1.由于干燥会造成填料收缩和盐的析出，因此请用附带的堵头密封，保存在温差小的阴冷处。
2.请使用碱性水溶液来保存。
3.请尽量避免在0℃以下保存色谱柱。
色谱柱的连接
1. 如图1所示，该色谱柱使用了过滤筛板埋入式尾端接头，因此无法只更换过滤筛板。
2. 请按照图1所示进行配管连接。若配管不匹配，特别是直接使用其他类型色谱柱所用配管时，锥箍前端的长度（图1中的V）与尾端接头的长度（图1中的L）经常会不同，因而引发故障。
若L＞V，会产生死体积，甚至出现色谱峰展宽或拖尾现象，并且分离变差。若L＜V，由于锥箍无法密封，所以会导致漏液。
※ 频繁更换色谱柱，可能会导致螺头的锥箍损坏而发生漏液现象。这种情况下若进一步拧紧，螺母的头部可能会断裂。
故障与对策
使用高效液相色谱法进行测定时所出现的问题，存在各种原因。但由于无法将其一一列举，故在此只说明色谱柱及其周边较容易出现的问题。
| 问题现象 | 原因 | 对策 |
|---|---|---|
| 色谱柱压升高 | 异物堵塞 ①流动相、样品溶液中杂质、不溶物 ②配管内的水垢 ③活塞密封圈的碎片 ④样品成分的析出 |
・预先用滤膜对流动相、样品溶液进行过滤。 ・安装线上过滤器。 ・清理配管及更换活塞密封圈。 ・使用流动相配制样品溶液。 |
| 色谱峰分裂、拖尾、展宽 | ①由于配管连接错误导致产生死体积 ②流动相条件不适合 ・离子抑制法：抑制不充分（样品量过多） ・离子对法：离子对试剂浓度不足（样品量过多） ③色谱柱劣化 ※若色谱柱劣化或填充层出现裂隙，则无法进行修复。 |
・重新连接配管。 ・考察pH、盐浓度、样品量等。 ・考察离子对试剂浓度、pH、样品量等。 ・通过柱效检测来确认色谱柱性能 |
| 保留时间延迟或不稳定 | ①漏液（根据泵压值进行判断） ②流动相条件不适合 ③色谱柱的平衡时间不够 |
・检查泵、配管系列的漏液情况。 ・充分平衡。 |
| 保留时间变短 | ①使用强酸或碱导致配位基断裂（劣化） ②流动相条件不适合 ③色谱柱的平衡时间不够 |
・充分平衡。 |
SUCREBEAD II 在出厂前已进行了严格的性能检查。但是万一出现不合格产品，请麻烦您联系我公司。
但是，若未按照色谱柱寿命相关事项或上述使用注意事项进行使用而导致劣化时，我们不能承担该类责任，望请谅解。
收到商品后10天以内若无投诉，即可认定为合格品。在此之后不能再更换，望请谅解。
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