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CAPCELL CORE WP / MP

什么是CAPCELL CORE WP和MP

CAPCELL CORE WP和CAPCELL CORE MP分别为孔径30 nm和16 nm的大孔径核-壳柱。为了充分发挥各自在保留和分离蛋白及多肽领域的优势,针对不同孔径,分别对十八烷基的导入量进行了优化,实现了不同的分离特性。

物性值

官能团 细孔径
(nm)
粒径
(μm)
比表面积
(m2/g)
C% 耐压
(MPa)
pH范围
C18 (WP) 30 2.7 40 1.3 60 *48 2~10
C18 (MP) 16 2.7 90 5 60 2~10

* 4.6 mm i.d. WP色谱柱耐压为48 MPa

 

 

CAPCELL CORE WP和MP的特点


为充分发挥CAPCELL CORE WP / MP色谱柱对蛋白和多肽的分离优势,针对不同孔径分别对十八烷基的导入量进行了优化,实现了不同的分离特性。不仅如此,由于填料具有核-壳型的几何构造,分析时,在较低压力下就能实现高分离度,因此也能够应用到普通的HPLC设备上。

 

标准多肽的分析

 

 

【液相条件】
色谱柱:CAPCELL CORE C18 S2.7; 2.1 mm i.d. × 100 mm

    CAPCELL CORE C18 MP S2.7; 2.1 mm i.d. × 100 mm

    CAPCELL CORE C18 WP S2.7; 2.1 mm i.d. × 100 mm
流动相:A) 0.1 vol% TFA B) 0.1 vol% TFA, CH3CN

    B% 15%(0 min)->30%(15 min)->15%(15.1 min)
流 速:0.2 mL/min
温 度:40℃
检测器:PDA 220 or 280 nm
进样量:2 μL
样 品:6种多肽各0.1 mg/mL

 

CAPCELL CORE MP/WP的核-壳结构带来了高分离度。因此,即使使用100 mm的短柱长,也能实现以下分离,不仅分离度得到改善,分析时间也缩短了。

 

酪朊酸(胰蛋白酶水解产物)的分析

 

 

色谱柱:CAPCELL CORE C18 MP S2.7; 2.1 mm i.d. × 100 mm
流动相:A) 0.1 vol% 三氟乙酸,水 B) 0.1 vol% 三氟乙酸,乙腈

    B% 10%(0 min)->50%(20 min)->10%(20.1 min)
流 速:0.2 mL/min
温 度:40℃
检测器:PDA 220 nm
进样量:2 μL

产品一览表

■WP

 

产品编号 类型 粒径
(μm)
内径
(mm)
长度
(mm)
F51232 CORE 2.7 2.1 35
F51233 CORE 2.7 2.1 50
F51234 CORE 2.7 2.1 75
F51235 CORE 2.7 2.1 100
F51236 CORE 2.7 2.1 150
F51244 CORE 2.7 4.6 50
F51245 CORE 2.7 4.6 75
F51246 CORE 2.7 4.6 100
F51247 CORE 2.7 4.6 150
F3650 CORE 柱芯 2.7 2.1 5
 
■MP

 

产品编号 类型 粒径
(μm)
内径
(mm)
长度
(mm)
F51212 CORE 2.7 2.1 35
F51213 CORE 2.7 2.1 50
F51214 CORE 2.7 2.1 75
F51215 CORE 2.7 2.1 100
F51216 CORE 2.7 2.1 150
F51224 CORE 2.7 4.6 50
F51225 CORE 2.7 4.6 75
F51226 CORE 2.7 4.6 100
F51227 CORE 2.7 4.6 150
F3649 CORE 柱芯 2.7 2.1 5
 

CAPCELL CORE系列高效液相色谱柱使用说明书

 

在此,非常感谢您选购我公司的高性能核-壳型CAPCELL CORE系列色谱柱。
CAPCELL CORE系列色谱柱是以粒径1.7 μm的表面多孔性硅胶(由直径1.7 μm的实心核和厚度0.5 μm的多孔硅胶层组成)为基质,在多孔硅胶层表面包覆了单层有机硅聚合物薄膜,并在其上键合了不同官能团的高性能核-壳色谱柱。
为了能够长期且稳定地使用CAPCELL CORE系列色谱柱,请在熟读该使用说明书后进行正确使用。

色谱柱的使用

1) 强烈撞击可能会造成色谱柱劣化,请小心谨慎使用。

2) 请在压力指示为0时进行色谱柱的安装和拆卸。

3) 内径为4.6 mm i.d. 的WP色谱柱最大耐压值为48 MPa,其他CAPCELL CORE C18 MP/WP色谱柱的最大耐压值为60 MPa。

色谱柱的安装

1) 色谱柱的接头使用了外径1/16英寸配管用螺头(MALE NUT)。请确保装置的配管接头正确连接,并且锥箍的顶端已插入接头内侧(参照图1)。

2) 安装色谱柱之前,请将装置配管内的液体置换成所用的流动相。

※请确认色谱柱出厂时的保存溶剂(记录在色谱柱附带的报告中),并注意盐析现象等。

3) 请按照色谱柱标签上的箭头方向来安装色谱柱。

 

分析

 

流动相

 

1) 可用流动相的种类与一般化学键合型硅胶类色谱柱所使用的流动相相同。

2) CAPCELL CORE系列色谱柱的pH使用范围根据键合基团的不同而有所变化。物性值如表1所示。

 可用pH范围是以保留时间和理论塔板数不会提早减少为评价基准的。

 为防止色谱柱的早期劣化,请注意流动相的pH不要超过表1的范围。如果pH发生大幅度的变化,会引起重现性变差、色谱柱提前劣化等问题。

 在有机溶剂含量少、色谱柱温度高的条件下,耐酸耐碱性能会降低。

 

表1 CAPCELL CORE系列色谱柱物性值

 

官能团 细孔径
(nm)
粒径
(μm)
比表面积
(m2/g)
C% 密度
(μmol/m2)
pH范围 耐压
C18 (十八烷基) 9 2.7 150 7 2.9 1.5~10 60
C18 (十八烷基) 16 2.7 90 5 2.6 2~10 60
C18 (十八烷基) 30 2.7 40 1.3 1.5 2~10 60
ADME (金刚烷基) 9 2.7 150 5.5 2.5 2~9
AQ (C27) 16 2.7 90 4 1.4 2~10 60
PFP (五氟苯基) 9 2.7 150 5 3.1 2~10 60
PC (磷酸胆碱基) 9 2.7 150 0.94 2~7.5 60

 

※色谱柱寿命随测定温度和流动相有机溶剂含量而改变。
3) 请过滤(0.45 μm以下滤膜)流动相去除杂质后再进行充分脱气。另外,为防止由异物导致的色谱柱入口处过滤筛板堵塞,建议使用线上过滤器。
4) 新色谱柱使用出厂报告中标示的流动相封存。若要置换成含无机盐的流动相,请注意置换程序,不要造成盐析。

5) 以下使用方法一般会导致色谱柱劣化,请避免此类操作。

 频繁变更流动相的组成或直接变换成相溶性差的流动相

 色谱柱入口压力急剧变化

 使用高粘度流动相导致高柱压

 用水长时间冲洗

 

样品溶液的配制

 

1) 请尽量将样品溶解在流动相中进行分析。

2) 样品溶液若采用洗脱能力强的溶剂,可能会造成色谱峰的展宽,分离度变差,并且在色谱柱入口处会有样品析出,故需注意。

3) 样品溶液中如有不溶物时,请用滤膜(0.45μm以下)过滤。

4) 样品溶液的pH请不要超过色谱柱的可用pH范围。


分析时的注意事项

 

由于CAPCELL CORE采用了核-壳基质,因此填料的比表面积比完全多孔型要小,负载量也相对较少。因此,从完全多孔型填料柱过渡到CAPCELL CORE时,如果原来是在负载量上限附近进行分析的,那么有必要降低样品导入量。

色谱柱的保存

1) 请用附带的堵头密封,保存在温差小的阴冷处。

2) 一个月以内的保存,请使用与所用流动相组成相同的有机溶剂和水的混合溶液(不含酸和无机盐)进行置换(避免只用水来进行置换)。

3) 若是一个月以上的长期保存,在进行了2的处理后,用出厂时的溶剂置换保存(请参考出厂报告)。

色谱柱的连接

请按照图1所示进行配管连接。若配管不匹配,特别是直接使用其他类型色谱柱所用配管时,锥箍前端的长度(图1中的V)与尾端接头的长度(图1中的L)经常会不同,因而引发故障。
若L>V,会产生死体积,甚至出现色谱峰展宽或拖尾现象,并且分离变差。
若L<V,由于锥箍无法密封,所以会导致漏液。
※ 频繁更换色谱柱,可能会导致螺头的锥箍损坏而发生漏液现象。这种情况下若进一步拧紧,螺母的头部可能会发生断裂。

图1 色谱柱的连接图

 

故障与对策

使用高效液相色谱法进行测定时所出现的问题,存在各种原因。但由于无法将其一一列举,故在此只说明色谱柱及其周边较容易出现的问题。

 

问题现象 原因 对策
色谱柱压升高 异物堵塞
①流动相、样品溶液中杂质、不溶物
②配管内的水垢
③活塞密封圈的碎片
④样品成分的析出
预先用滤膜对流动相、样品溶液进行过滤。
安装线上过滤器。
清理配管及更换活塞密封圈。
使用流动相配制样品溶液。
色谱峰分裂、拖尾、展宽 ①由于配管连接错误导致产生死体积
②流动相条件不适合
离子抑制法:抑制不充分(样品量过多)
离子对法:离子对试剂浓度不足(样品量过多)
③色谱柱劣化
※若色谱柱劣化或填充层出现裂隙,则无法进行修复。
重新连接配管。
考察pH、盐浓度、样品量等。
考察离子对试剂浓度、pH、样品量等。
通过柱效检测来确认色谱柱性能
保留时间延迟或不稳定 ①漏液(根据泵压值进行判断)
②流动相条件不适合
③色谱柱的平衡时间不够
检查泵、配管系列的漏液情况。
充分平衡。
保留时间变短 ①使用强酸或碱导致配位基断裂(劣化)
②流动相条件不适合
③色谱柱的平衡时间不够
充分平衡。

 

CAPCELL CORE系列色谱柱在出厂前已进行了严格的性能检查。但是万一出现不合格产品,请麻烦您联系我公司。
但是,若未按照色谱柱寿命相关事项或上述使用注意事项进行使用而导致劣化时,我们不能承担该类责任,望请谅解。
收到商品后10天以内若无投诉,即可认定为合格品。在此之后不能再更换,望请谅解。

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