胡黄连含量测定 参考《中国药典》(2025年版)一部
胡黄连为玄参科植物胡黄连的干燥根茎。秋季采挖,除去须根和泥沙,晒干。功能与主治:退虚热,除疳热,清湿热。用于骨蒸潮热,小儿疳热,湿热泻痢,黄疸尿赤,痔疮肿痛。
按照《中国药典》(2025年版)一部胡黄连含量测定项下分析方法,要求理论板数按胡黄连苷Ⅱ峰计算应不低于3,000。
按照药典方法,我们分别用DAISOPAK ODS-RPS和DAISOPAK ODS-P两款色谱柱进行测试,都能满足药典的要求。
DAISOPAK ODS-RPS 分析结果
DAISOPAK ODS-RPS色谱柱对供试品溶液测试结果如图1和表1所示,其中供试品溶液中胡黄连苷Ⅱ的理论塔板数为6,469,大于药典中规定的3,000,主峰和杂质峰之间的分离度能够满足药典要求。
图1 ODS-RPS分析谱图
表1 各峰积分结果表(供试品溶液)
【色谱条件】
色谱柱:DAISOPAK ODS-RPS 5 μm; 4.6×250 mm
流动相:甲醇 / 水 / 磷酸 = 35 / 65 / 0.1
流速:1.0 mL/min
柱温:25 ℃
检测:PDA 275 nm
进样量:10 μL
供试品溶液的制备:取本品粉末(过三号筛)约0.1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50 mL,密塞,称定重量,超声处理(功率250 W,频率33 kHz)30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液1 mL,置5 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。
DAISOPAK ODS-P 分析结果
DAISOPAK ODS-P色谱柱供试品溶液测试结果如图2和表2所示,其中供试品溶液中胡黄连苷Ⅱ的理论塔板数为6,567大于药典中规定的3,000,主峰和杂质峰之间的分离度满足药典要求。
图2 ODS-P分析谱图
表2 峰积分结果表(供试品溶液)
【色谱条件】
色谱柱:DP ODS-P 5 μm; 4.6×250 mm
流动相:甲醇 / 水 / 磷酸 = 35 / 65 / 0.1
流速:1.0 mL/min
柱温:25 ℃
检测:PDA 275 nm
进样量:10 μL
供试品溶液的制备:取本品粉末(过三号筛)约0.1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50 mL,密塞,称定重量,超声处理(功率250 W,频率33 kHz)30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液1 mL,置5 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。
综上所述,使用DAISOPAK SP-120-5-ODS-RPS 4.6 mm i.d. × 250 mm和DAISOPAK SP-100-5-ODS-P 4.6 mm i.d. × 250 mm色谱柱,测试结果均满足《中国药典》(2025年版)中的要求。由于样品基质比较复杂,无法确定目标峰里是否仍包含未分离的杂质,以上实验结果供用户参考。
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